在室温中
植物ELISA检测试剂盒操作的流程事项
植物ELISA检测试剂盒操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，注意不要有气泡，轻轻混匀，酶标板加上盖，37℃反应120分钟。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。
3.每孔加检测溶液A工作液100ul，37℃,60分钟。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。
5.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显)。
6.依序每孔加终止溶液50ul，终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
植物ELISA检测试剂盒注意事项：
1．洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
2．一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
3．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
4．如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。
5．在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
6．底物请避光保存。
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