在植物elisa检测试剂盒检测中除了包被外，一般需进行45加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。
1、把试剂混匀，切记实验时不要加理大量含有泡沫的液体，避免实验产生误差。
2、跟数据测样决定板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔 加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7、每孔加入底物各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。一定要避免光照。
8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
操作注意事项：
1、试剂应按标签说明储存，使用前恢复到室温.稀稀过后的标准品应丢弃；
2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存；
3、用干净的塑料容器配置洗涤液，用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品；
4、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水；
5、底物A应挥发避免长时间打开盖，底物B对光敏感避免长时间暴露于光下；
6、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
在线客服
电话咨询
