鸡elisa检测试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。鸡elisa检测试剂盒适用于体外定性检测鸡血清中的抗体ELISA检测。
实验原理:
用纯化的MT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的MT抗体、HRP标记的亲和素,经 过*洗涤后用底物(TMB)显色。
1、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
2、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
3、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
4、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
贮藏时应注意以下几点:
1、样品不能太稀,必须浓缩到一定浓度才能封装贮藏,样品太稀易降解、变性。
2、一般需加入防腐剂和稳定剂,酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等,也可加入底物和辅酶以提高其稳定性。此外,钙、锌、硼酸等溶液对某些酶也有一定保护作用。
3、贮藏温度要求低,避免反复冻融。