引起小鼠ELISA检测试剂盒测定结果错误的原因

　　引起小鼠ELISA检测试剂盒测定结果错误的原因
　　
　　小鼠ELISA检测试剂盒样品收集、处理方法：
　　
　　1、血清-----室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
　　
　　2、血浆-----应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
　　
　　3、细胞培养上清---检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清
　　
　　4、组织标本-----切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用
　　
　　5、培养细胞-----检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
　　
　　小鼠ELISA检测试剂盒常见问题解析：
　　
　　1.加样量不一致？
　　
　　解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
　　
　　2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？
　　
　　解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与*次接近。
　　
　　3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？
　　
　　解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。
　　
　　ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。