上海仁捷生物人Tau蛋白（Tau）ELISA试剂盒的灵敏度怎么样？

上海仁捷生物人Tau蛋白（Tau）ELISA试剂盒的灵敏度怎么样？

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人Tau蛋白（Tau）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人Tau蛋白（Tau）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒性能

1.  检测范围：75 pg/mL – 2400 pg/mL。

2.  灵敏度：检测浓度小于10 pg/mL。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

实验结果计算

以所标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

而配对抗体作为核心试剂，是实验的关键因素，是真正意义上的CP。并非所有抗体都能应用于ELISA应用，必须对单个抗体进行评估。首要关注抗体识别的免疫原区域辅助抗体对的选择。对于双抗夹心法CP选择有窍门，其中一个抗体作为捕获抗体包被在多孔板表面，固定抗原。另一个则被偶联，用于抗原的检测。两个抗体必须与同一抗原不同表位发生反应。即如果抗原通过捕获抗体固定在平板上，那么检测抗体必须能够与其他表位相互作用，而不会受到捕获抗体或平板的位阻。目前市面上也有很多供应商提供验证过夹心法ELISA的抗体对，可以依据实际情况选择。