山梨醇脱氢酶测试盒分析说明

山梨醇脱氢酶测试盒分析说明

产品说明： SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山梨醇含量的关健酶之一。SDH 催化山梨醇 脱氢生成果糖，同时还原 NAD+生成 NADH，生成的 NADH 能将电子传递给 NBT 生成紫色的甲臜，根据这一原 理可以计算 SDH 活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
山梨醇脱氢酶测试盒分析说明
样本处理
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4个）：提取液体积 （mL）为 500~1000：1 的比例加入提取液（建议 500 万细菌或细胞加入 1 mL 提取液），超声波破碎细菌或细 胞（冰浴，功率 20%或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000 ×g 4℃离心 10 min，取上清，置冰上待 测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加入 1 mL 提取液）， 进行冰浴匀浆。8000 ×g 4℃离心 10 min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样本：直接检测。