测定意义:羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,将邻二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化为Fe3+ ,导致536nm吸光度下降,样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了样品清除羟自由基的能力。
需要的仪器,耗材:恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。
样本处理
1、组织样本的制备:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆;10000g 4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2、血清、果汁等液体样本可直接测定。
3、提取物(或者药物)可配制成一定浓度,如 5mg/mL。