生化检测可以检测的样本类型的:
体液:血清(浆)、尿液、唾液等
组织:动植物组织
食品:果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等
其它:保健品、化妆品
测定意义:淀粉酶负责水解淀粉,主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
测定原理:还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
样本处理
称取约 0.1g 样本,加入 0.8mL 蒸馏水,研磨匀浆;将匀浆倒入离心管中,提取液在室温下放置提取 15min, 每 5min 振荡 1 次,使其充分提取;6000g,常温离心 10min,取上清液加蒸馏水定容至 10mL,摇匀,即淀粉酶原 液。
吸取上述淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 双蒸水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α+β)淀粉酶总活力的测定。