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兔elisa检测试剂盒是如何进行标本采集及保存的?

发布时间:2020-11-23   点击次数:1575次
  兔elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被兔骨成型蛋白4(BMP-4)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔骨成型蛋白4(BMP-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

  兔elisa检测试剂盒液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
  1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  3、尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
 
  兔elisa检测试剂盒的标本的采集及保存:
  1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  3、细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
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