兔elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被兔骨成型蛋白4（BMP-4）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔骨成型蛋白4（BMP-4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
1、血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3、尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5、组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
兔elisa检测试剂盒的标本的采集及保存：
1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3、细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
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