小鼠ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。
小鼠ELISA检测试剂盒的性能：
1、准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2、灵敏度：zui低检测浓度小于。
3、特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4、重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5、贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
1、实验的原理似乎很简单，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗涤和封闭。然而，即使是平淡无奇的洗涤和封闭，如果做得不太好，也有可能毁了整个实验。
2、在实验结束时，我们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于结果的信噪比。背景噪音会影响您对结果的判断。
3、洗涤很重要：洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。
4、如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。
5、小鼠ELISA检测试剂盒封闭更关键：封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。
6、您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。
7、如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。
8、好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
9、蛋白封闭液则有所不同，是的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。
10、血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。
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