在ELISA实验过程中时常会出现我们时常说的"花板"现象,这种现象影响检验结果的正确判读,对工作造成一定的不利影响。
一旦出现“花板”,实验结果必须放弃,不仅浪费物料和时间,而且还会出现样本量缺少、交叉污染、报告延迟等一系列问题。
所谓“花板”,就是空白、阴性、阳性对照及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却偏高,弱阳性结果较多
“花板”现象的出现,往往会给实验者判读结果带来麻烦。仁捷生物对“花板”现象进行了分析和总结,认为花板原因大多在样品,解决办法主要在洗涤,孵育和显色过程也会导致。
花板原因大多在样品
“花板之所以空白、对照及质控结果正常而标本孔异常,是因为样品本身的原因,大部分或全部标本孔的OD值偏高,很可能是因为样品中某些共有的物质非特异性的吸附于固相载体,而在实验的过程中未被除去。
待测血清中混有红细胞或纤维蛋白原 这两种物质易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净。实验中,在较高的离心转速(3000 /min)和较长的离心时间(>10 min)之下,血液标本被充分地离心分离之后,使红细胞和纤维蛋白充分沉淀,可以在加样时避免加入红细胞和纤维蛋白,避免这两种干扰物质对实验结果的影响,就可避免“花板”情况。
解决办法主要在洗涤
聚苯乙烯因其具有较强的吸附蛋白质的性能而被广泛用于ELISA实验的固相载体,聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,因此需要通过洗涤清除在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。
血清中存在红细胞或纤维蛋白原,可以在加样前离心时得到控制,同样也可以通过适当增加洗涤次数和浸泡时间减轻或避免对实验结果的影响。同样,对于血液存在的非特异性的IgG很难在加样时将其去除,那么解决的Z佳时机就是洗涤过程。
在ELISA实验过程中时常会出现我们时常说的"花板"现象,这种现象影响检验结果的正确判读,对工作造成一定的不利影响。
一旦出现“花板”,实验结果必须放弃,不仅浪费物料和时间,而且还会出现样本量缺少、交叉污染、报告延迟等一系列问题。
所谓“花板”,就是空白、阴性、阳性对照及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却偏高,弱阳性结果较多。
“花板”现象的出现,往往会给实验者判读结果带来麻烦。仁捷生物对“花板”现象进行了分析和总结,认为花板原因大多在样品,解决办法主要在洗涤,孵育和显色过程也会导致。
花板原因大多在样品
“花板之所以空白、对照及质控结果正常而标本孔异常,是因为样品本身的原因,大部分或全部标本孔的OD值偏高,很可能是因为样品中某些共有的物质非特异性的吸附于固相载体,而在实验的过程中未被除去。
待测血清中混有红细胞或纤维蛋白原 这两种物质易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净。实验中,在较高的离心转速(3000 /min)和较长的离心时间(>10 min)之下,血液标本被充分地离心分离之后,使红细胞和纤维蛋白充分沉淀,可以在加样时避免加入红细胞和纤维蛋白,避免这两种干扰物质对实验结果的影响,就可避免“花板”情况。
解决办法主要在洗涤
聚苯乙烯因其具有较强的吸附蛋白质的性能而被广泛用于ELISA实验的固相载体,聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,因此需要通过洗涤清除在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。
血清中存在红细胞或纤维蛋白原,可以在加样前离心时得到控制,同样也可以通过适当增加洗涤次数和浸泡时间减轻或避免对实验结果的影响。同样,对于血液存在的非特异性的IgG很难在加样时将其去除,那么解决的Z佳时机就是洗涤过程。