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人骨涎蛋白ELISA试剂盒/实验操作

发布时间:2020-07-02   点击次数:751次

Elisa试剂盒 性能:

 1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

 2.灵敏度:低检测浓度小于10 pg/ml。

 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

 4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

 有效期:6个月

 

 

样本处理及要求

1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

 

 

样本收集保存

  1、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

  2、血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

  3、细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

  5、保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

 

 

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