鱼elisa检测试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在各领域中。
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:zui低检测浓度小于0.1 ng/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
操作步骤:
1、编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔。
2、加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7、温育:操作同3。
8、洗涤:操作同5。
9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。
10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应。
11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。