人elisa检测试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）水平。用纯化的人迁移率族蛋白B1（HMGB-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加高迁移率族蛋白B1（HMGB-1），再与HRP标记的高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）抗体结合形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的高迁移率族蛋白B（HMGB-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算品中人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）浓度。
ELISA测定结果分为定量和定性两大类。
1、定量测定则是对比昂本中待测抗原的多少进行量值测定，一具体数值表示。它是用于非病原体抗原物质的测定。如激素，细胞因子，肿瘤标志物，小分子药物等。定量测定的“量值”依据是试剂盒中所带标准品同时测定得出的剂量反应曲线(又称标准曲线)。
2、定性测定只是对标本中是否含有待测定抗原或抗体做出“有”或“无”的结论，分别用“阳性”和“阴性”来表示。通常是用于传染性病原体的抗原或抗体的测定，以判断特定病原体感染的存在与否。定性测定的“阳性”和“阴性”的判定依据必须是试剂盒所确定的阳性判定值。以前很多基层实验室均使用卫生部临床检验中心供应的弱阳性定值质控血清的测定吸光度来判定结果，高于其判为阳性，反之为阴性，而不管试剂盒CUT-OFF值如何。
1、试剂盒使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完，请废弃。
2、微量试剂运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3、从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。
4、不同批号的试剂盒组份避免混用（洗涤液和反应终止液除外）。
5、充分轻微混匀对反应结果尤为重要，使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7、试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。
8、试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室安全防护条列执行。
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