看这儿,大鼠ELISA检测试剂盒的使用方法和选购常识介绍
实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的
大鼠ELISA检测试剂盒的双抗体夹心法及ELISA间接法服务。
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
大鼠ELISA检测试剂盒选购知识:
01.特异性
大鼠ELISA检测试剂盒的特异性与试剂盒的要害组分、抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个有必要为单抗,主张运用双单抗。
02.活络度
大鼠ELISA检测试剂盒的活络度反映的是试剂盒检出被检物质的zui低量的能力,用户可根据自己样本中待检目标的量挑选适宜的试剂盒,假如待检目标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可挑选高敏的elisa试剂盒。
03.重复性
科学试验讲究重复性,一般大鼠ELISA检测试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
04.简便性
大鼠ELISA检测试剂盒在确保高质量数据的情况下,试验时刻越短,操作越便当,越简单受到用户欢迎!这也不妨作为挑选试剂盒的一个目标。