欢迎来到上海仁捷生物科技有限公司网站!
技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 人ELISA检测试剂盒试验操作程序检验结果

人ELISA检测试剂盒试验操作程序检验结果

发布时间:2017-10-23   点击次数:1625次
  人ELISA检测试剂盒试验操作程序检验结果
  
  人ELISA检测试剂盒样本要求
  
  人ELISA检测试剂盒样本类型和采集
  
  以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
  
  1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在-20℃以下,避免反复冻融。
  
  2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在-20℃以下,避免反复冻融。
  
  3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
  
  人ELISA检测试剂盒操作程序
  
  1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
  
  2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
  
  3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
  
  4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加。
  
  5、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
  
  6、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  
  7、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
  
  8、如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
  
  9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
  
  10、所有孔加入终止液50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。
  
  
Baidu
map